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如何读懂色谱图

编辑:小T来源:泰特仪器日期:2017-08-28

如何读懂色谱图

 

    色谱图是指样品流经色谱柱分离的各组分在检测器中形成的检测信号随时间分布的信号-时间曲线,也称为色谱流出曲线。色谱图的纵坐标为检测器的响应信号,横坐标为时间、体积或距离。色谱图是色谱仪检测定性定量分析样品的重要依据,色谱图显示的保留时间及峰高可以作为色谱仪实现定性分析的依据,色谱峰所包罗的峰面积可作为定量分析的依据。因此,了解色谱图的各项参数便可得出准确有效的检测结果。

    色谱峰(peak):检测器对每个组分所给出的信号,在记录仪上表现为一个个的峰,称为色谱峰。色谱峰上的极大值是定性分析的依据,而色谱峰所包罗的面积则取决于对应组分的含量,故峰面积是定量分析的依据。正常色谱峰近似于对称形正态分布曲线,在检测过程中,由于操作不当会引起色谱仪出峰异常的现象,会出现不对称峰或是鬼峰现象。

    基线(base line):经流动相冲洗,柱与流动相达到平衡后,检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。色谱仪器运行时,由于检测条件的变化,会引起的信号线的位置发生变化,称为基线漂移。

   噪音(noise):基线信号的波动。通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。

   漂移(drift):基线随时间的缓缓变化。主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起,柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。

   拖尾因子(tailing factor,T):用以衡量色谱峰的对称性,也称为对称因子或不对称因子。《中国药典》规定T应为0.95~1.05。T<0.95为前延峰,T>1.05为拖尾峰。

  峰底:基线上峰的起点至终点的距离。

  峰高(peak height,h):峰的最高点至峰底的距离。

 峰宽(peak width,W):峰两侧拐点处所作两条切线与基线的两个交点间的距离。W=4σ

半峰宽(peak width at half-height,Wh/2):峰高一半处的峰宽。Wh/2=2.355σ

   标准偏差(standard deviation,σ):正态分布曲线x=±1时(拐点)的峰宽之半。正常峰的拐点在峰高的0.607倍处。标准偏差的大小说明组分在流出色谱柱过程中的分散程度。σ小,分散程度小、极点浓度高、峰形瘦、柱效高;反之,σ大,峰形胖、柱效低。

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